
تعداد نشریات | 41 |
تعداد شمارهها | 1,172 |
تعداد مقالات | 10,099 |
تعداد مشاهده مقاله | 18,935,532 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 13,134,787 |
بررسی مقایسهای میزان بیان ژنهای اتوفاژی (Atg5 و Beclin-1) در تخمک MII موش سوری پس از انجماد شیشهای با دو محلول انجمادی مختلف به روش کرایوتاپ | ||
فصلنامه علمی زیست شناسی جانوری تجربی | ||
دوره 11، شماره 4 - شماره پیاپی 44، خرداد 1402، صفحه 117-128 اصل مقاله (353.97 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.30473/eab.2023.68842.1921 | ||
نویسندگان | ||
حامد دانش پژوه1؛ نسیم حیاتی رودباری1؛ مهدی دیانت پور* 1، 2؛ یاسر تهمتنی3؛ زهرا خدابنده جهرمی2 | ||
1گروه زیستشناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران | ||
2مرکز تحقیقات فناوری سلولهای بنیادی، دانشگاه علومپزشکی شیراز، شیراز، ایران | ||
3گروه سلولهای بنیادی و زیستشناسی تکوینی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، موسسه زیستشناسی و فناوری سلولهای بنیادی رویان، ACECR، تهران، ایران | ||
چکیده | ||
انجماد یک روش نگهداری طولانی مدت تخمک میباشد که در روشهای کمکی باروری نقش مهمی دارد. هدف از مطالعه حاضر بررسی اثر دو محلول انجمادی و دوستاکسل بر تغییر بیان ژنهای اتوفاژی همچون Atg5 و Beclin-1 در تخمک MII موش سوری پس از انجماد شیشهای با روش کرایوتاپ میباشد. برای رسیدن به این هدف، تخمکهای MII موش سوری جمعآوری شده و در دو غلظت متفاوت از محلولهای انجمادی اتیلن گلیکول 15%، دی متیل سولفوکساید 15% و سوکروز 5/0 مولار در گروه (VS1)A و اتیلن گلیکول 5/7 %، گلیسرول 5/7 % و سوکروز 5/0 مولار در گروه (VS2)B منجمد شدند و برخی از گروهها قبل از انجماد تحت تاثیر دوستاکسل قرار گرفتند. پس از ذوب، تخمکها لقاح داده شدند. درصد زندهمانی و لقاح تخمکهای منجمد و ذوب شده ارزیابی و تغییر بیان ژنهای (Atg5 و Beclin-1) با روش RT-PCR بررسی شد. نتایج نشان داد تفاوتهای معنیداری بین درصد بقا و درصد لقاح گروههای انجمادی در مقایسه با گروه کنترل وجود دارد (P<0.05). درصد زندهمانی و لقاح در گروه VS1 نسبت به گروه VS2 کاهش یافت. همچنین درصد زندهمانی و لقاح گروههای پیش انکوبه شده با دوستاکسل بیشتر از گروههای انکوبه نشده بود. این مطالعه نشان داد انجماد شیشهای با کرایوتاپ، ترازهای نسخهبرداری ژنهای اتوفاژی را در اووسیتهای MII منجمد ذوب شده تغییر میدهد همچنین پیش انکوبه کردن اووسیت با دوستاکسل قبل از انجماد شیشهای میتواند تراز نسخهبرداری Atg5 و Beclin-1 را در گروههای آزمایشی کاهش دهد و در بالا بردن درصد بقا و درصد تشکیل جنینهای دو سلولی موثر واقع شود. | ||
کلیدواژهها | ||
انجماد شیشهای؛ تخمک؛ دوستاکسل؛ کرایوتاپ؛ Atg5 و Beclin-1 | ||
عنوان مقاله [English] | ||
Comparative investigation of the expression level of autophagy genes (Atg5 and Beclin-1) in mouse MII oocytes after vitrification with two different freezing solutions by cryotop method | ||
نویسندگان [English] | ||
Hamed Daneshpazhouh1؛ Nasim Hayati Roodbari1؛ Mehdi Dianatpour1، 2؛ Yaser Tahamtani3؛ zahra khodabandeh2 | ||
1Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran | ||
2Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran|Stem Cells Technology Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran | ||
3Department of Stem Cells and Developmental Biology, Cell Science Research Center, Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Tehran, Iran | ||
چکیده [English] | ||
Freezing is a long-term egg storage method that plays an important role in assisted reproductive methods. The aim of the present study is to investigate the effect of freezing solutions and docetaxel on the expression changes of autophagy genes such as Atg5 and Beclin-1 in mouse MII oocytes after glass freezing by cryotop method. To achieve this goal, mouse MII oocytes were collected and frozen in two different concentrations of 15% ethylene glycol, 15% dimethyl sulfoxide and 0.5 M sucrose in group A (VS1) and 7.5% ethylene glycol, glycerol. 7.5% and 0.5 M sucrose were frozen in group B (VS2) and some groups were affected by docetaxel before freezing. After thawing, the eggs were fertilized.The percentage of survival and fertilization of frozen and thawed oocytes was evaluated and the expression changes of genes (Atg5 and Beclin-1) were investigated by RT-PCR method. The results showed that there are significant differences between the percentage of survival and the percentage of fertilization in the freezing groups compared to the control group (P<0.05). The percentage of survival and fertilization in the VS1 group decreased compared to the VS2 group. Also, the percentage of survival and conception of the groups pre-incubated with Docetaxel was higher than the non-incubated groups. This study showed that vitrification with cryotop changes the transcript levels of autophagy genes in frozen-thawed MII oocytes, and pre-incubation of oocytes with docetaxel before vitrification can decrease the transcript levels of Atg5 and Beclin-1 in the experimental groups and above Increase the percentage of survival and the percentage of formation of two-celled embryos. | ||
کلیدواژهها [English] | ||
Vitrification, oocyte, Docetaxel, Cryotop, ATG5, Beclin-1 | ||
مراجع | ||
Abedpour, N., & Rajaei, F. (2015). Vitrification by cryotop and the maturation, fertilization, and developmental rates of mouse oocytes. Iranian Red Crescent Medical Journal, 17(10).
Bissery, M. C. (1995). Preclinical pharmacology of docetaxel. European Journal of Cancer, 31, S1-S6.
Boiso, I., Martí, M., Santaló, J., Ponsá, M., Barri, P. N., & Veiga, A. (2002). A confocal microscopy analysis of the spindle and chromosome configurations of human oocytes cryopreserved at the germinal vesicle and metaphase II stage. Human reproduction, 17(7), 1885-1891.
Bouquet, M., Selva, J., & Auroux, M. (1992). The incidence of chromosomal abnormalities in frozen—thawed mouse oocytes after in-vitro fertilization. Human Reproduction, 7(1), 76-80.
Chasombat, J., Nagai, T., Parnpai, R., & Vongpralub, T. (2015). Pretreatment of in vitro matured bovine oocytes with docetaxel before vitrification: effects on cytoskeleton integrity and developmental ability after warming. Cryobiology, 71(2), 216-223.
Ciotti, P. M., Porcu, E., Notarangelo, L., Magrini, O., Bazzocchi, A., & Venturoli, S. (2009). Meiotic spindle recovery is faster in vitrification of human oocytes compared to slow freezing. Fertility and Sterility, 91(6), 2399-2407.
Dehghani, N., Dianatpour, M., Hosseini, S. E., Khodabandeh, Z., & Daneshpazhouh, H. (2019). Overexpression of mitochondrial genes (mitochondrial transcription factor A and cytochrome c oxidase subunit 1) in mouse metaphase II oocytes following vitrification via cryotop. Iranian Journal of Medical Sciences, 44(5), 406.
Devillard, L., Vandroux, D., Tissier, C., Dumont, L., Borgeot, J., Rochette, L., & Athias, P. (2008). Involvement of microtubules in the tolerance of cardiomyocytes to cold ischemia-reperfusion. Molecular and cellular biochemistry, 307, 149-157.
Gueritte-Voegelein, F., Guenard, D., Lavelle, F., Le Goff, M. T., Mangatal, L., & Potier, P. (1991). Relationships between the structure of taxol analogs and their antimitotic activity. Journal of medicinal chemistry, 34(3), 992-998.
Huang, J. Y., Chen, H. Y., Park, J. Y. S., Tan, S. L., & Chian, R. C. (2008). Comparison of spindle and chromosome configuration in in vitro-and in vivo-matured mouse oocytes after vitrification. Fertility and Sterility, 90(4), 1424-1432.
Klionsky, D. J., & Emr, S. D. (2000). Autophagy as a regulated pathway of cellular degradation. Science, 290(5497), 1717-1721.
Klionsky, D. J., Cuervo, A. M., & Seglen, P. O. (2007). Methods for monitoring autophagy from yeast to human. Autophagy, 3(3), 181-206.
Khodabandeh Jahromi, Z., Amidi, F., Nori Mugehe, S. M. H., Sobhani, A., Mehrannia, K., Abbasi, M., ... & Ebrahimi, M. (2010). Expression of heat shock protein (HSP A1A) and MnSOD genes following vitrification of mouse MII oocytes with cryotop method. Cell Journal (Yakhteh), 12(1), 113-119.
Kuwayama, M. (2007). Highly efficient vitrification for cryopreservation of human oocytes and embryos: the Cryotop method. Theriogenology, 67(1), 73-80.
Liu, R. H., Sun, Q. Y., Li, Y. H., Jiao, L. H., & Wang, W. H. (2010). Effects of cooling on meiotic spindle structure and chromosome alignment within in vitro matured porcine oocytes. Molecular Reproduction and Development: Incorporating Gamete Research, 65(2), 212-218.
Mizushima, N. (2007). Autophagy: process and function. Genes & development, 21(22), 2861-2873.
Morató, R., Izquierdo, D., Albarracín, J. L., Anguita, B., Palomo, M. J., Jiménez‐Macedo, A. R., ... & Mogas, T. (2008). Effects of pre‐treating in vitro‐matured bovine oocytes with the cytoskeleton stabilizing agent taxol prior to vitrification. Molecular Reproduction and Development: Incorporating Gamete Research, 75(1), 191-201.
Roozbehi, A. (2013). Mouse oocytes and embryos cryotop-vitrification using low concentrated solutions: Effects on meiotic spindle, genetic material array and developmental ability. Iranian journal of basic medical sciences, 16(4), 590.
Soyoung, B., Hyejin, Sh., Haengseok, S., Chang, S S., Hyunjang, J L (2014). Autophagic activation in vitrified-warmed mouse oocytes. National library of medicine,148(1), 9-11.
Schmidt, D. W., Nedambale, T. L., Kim, C., Maier, D. B., Yang, X. J., & Tian, X. C. (2004). Effect of cytoskeleton stabilizing agents on bovine matured oocytes following vitrification. Fertility and Sterility, 82, S26.
Shi, W. Q., Zhu, S. E., Zhang, D., Wang, W. H., Tang, G. L., Hou, Y. P., & Tian, S. J. (2006). Improved development by Taxol pretreatment after vitrification of in vitro matured porcine oocytes. Reproduction, 131(4), 795-804.
Sparreboom, A., van Tellingen, O., Nooijen, W. J., & Beijnen, J. H. (1998). Preclinical pharmacokinetics of paclitaxel and docetaxel. Anti-cancer drugs, 9(1), 1-17.
Yue, Z., Jin, S., Yang, C., Levine, A. J., & Heintz, N. (2003). Beclin 1, an autophagy gene essential for early embryonic development, is a haploinsufficient tumor suppressor. Proceedings of the National Academy of Sciences, 100(25), 15077-15082.
Zhou, C. J., Wang, D. H., Niu, X. X., Kong, X. W., Li, Y. J., Ren, J., ... & Liang, C. G. (2016). High survival of mouse oocytes using an optimized vitrification protocol. Scientific reports, 6(1), 19465. | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 193 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 195 |